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酶活測定試劑盒在ATP酶反應(yīng)中的應(yīng)用

發(fā)布時間: 2023-01-16  點擊次數(shù): 1199次
  酶活測定試劑盒提供了一種強大而便捷的方法來測量活細胞中的Caspases酶活性。這些測定法利用含有識別位點的可滲透細胞的底物來測量Caspases3和7,Caspases8或Caspases9的活性,以及可以同時測量四種Caspases的多重檢測試劑盒。
 
  基于高度水溶性的四唑鹽進行測定。WST-8在電子介體的作用下可還原生成水溶性甲瓚產(chǎn)物,產(chǎn)生顏色反應(yīng)。WST-8被細胞中的脫氫酶還原而生成橙色產(chǎn)物(甲瓚),可溶于組織培養(yǎng)基中。細胞中脫氫酶產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物的量與活細胞的數(shù)量成正比。CCK-8法應(yīng)用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
 
  ATP酶,又稱為三磷酸腺苷酶,是一類能將三磷酸腺苷(ATP)催化水解為二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根離子的酶,這是一個釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下,能量可以通過傳遞而被用于驅(qū)動另一個需要能量的化學反應(yīng)。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。
 
  基于CCK-8試劑低的細胞毒性,實驗所用的細胞可用于后續(xù)的下游實驗;CCK-8是非放射性的,可在細胞增殖和細胞毒性實驗中,對活細胞進行靈敏的比色測定,從而計算出細胞數(shù)量。
 
  鳥苷-5'-三磷酸,(GTP),是一類嘌呤類核苷三磷酸,GTP在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起重要的作用,特別是和G蛋白作用時以及在二信使機制中,在GTP酶的催化作用下,GTP會轉(zhuǎn)化為GDP(二磷酸鳥苷)。
 
  GTP主要在以下幾個生物過程中起著重要作用:能量轉(zhuǎn)化GTP參與細胞中的能量轉(zhuǎn)化過程,比如,在三羧酸循環(huán)中,一種酶能產(chǎn)出GTP分子。這也相當于產(chǎn)生了一分子的ATP,因為GTP能被核苷二磷酸激酶(NDK)轉(zhuǎn)化為ATP分子。
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