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含量試劑盒實(shí)驗(yàn)溶液配置步驟

發(fā)布時(shí)間: 2023-02-06  點(diǎn)擊次數(shù): 1348次
  含量試劑盒中亞硫酸鈉能夠還原Fe3+為Fe2+,F(xiàn)e2+進(jìn)一步與2,2’-聯(lián)吡啶顯色,產(chǎn)物在520nm處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測(cè)鐵的含量。
 
  ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。
 
  HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,NADPH和ATP含量成正比,以此反應(yīng)ATP含量。
 
  溶液的配制:
 
  1.提取液低溫條件下,可能有結(jié)晶析出,放于60℃水浴加熱溶解即可,不影響使用。
 
  2.試劑二:臨用前加入7mL蒸餾水充分溶解,可加熱促進(jìn)溶解;
 
  3.試劑四:臨用前取1支加入0.2mL蒸餾水溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復(fù)凍融;
 
  4.試劑五:臨用前加入3.2mL蒸餾水充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;
 
  5.試劑六:臨用前取1支加入0.25mL蒸餾水備用,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復(fù)凍融;
 
  6.標(biāo)準(zhǔn)品:5mgATP。臨用前加入0.826mL蒸餾水配成10μmol/mL的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;
 
  7.工作液的配制:臨用前請(qǐng)按試劑二(mL):試劑三(mL):試劑四(mL):試劑五(mL):試劑六(mL)=1:1:0.1:0.4:0.1的比例配制(2.6mL,約10T的量),現(xiàn)配現(xiàn)用。
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