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你知道含量試劑盒怎么用嗎?

發(fā)布時間: 2022-02-22  點擊次數(shù): 1428次
  含量試劑盒提供了一種簡單方便的方案檢測樣品中亞鐵和/或鐵離子。檢測時,載鐵蛋白在酸性緩沖液中把高價鐵溶解溶液里。然后將其還原成亞鐵離子,F(xiàn)ereneS與鐵反應產(chǎn)生一種穩(wěn)定的化合物,593nm處有吸收峰。緩沖液中有一種特殊的螯合物消除Cu2+的干擾。試劑盒檢測線性范圍為50ul樣品中0.4-20nmol,或者鐵濃度在8uM-400uM之間的各種生物樣品。
 
  鐵是動物和人體生長發(fā)育所必需的微量元素之一。其在機體中參與機體能量代謝、載體組成、轉(zhuǎn)運和貯存營養(yǎng)素及機體免疫機能,是機體生化反應中多種酶的重要組分及活化因子。鐵在體內(nèi)主要以金屬絡合蛋白、亞鐵血紅素以及載氧蛋白的形式存在。無機鐵也參與到氧化還原反應中許多酶的鐵硫簇里,比如固氮酶和氫化酶。
 
  含量試劑盒操作步驟:
 
  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
 
  3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
 
  4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 
  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
 
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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